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2 次の文章を読み, 問1~ 問4に答えよ。
バソプレッシンは脳下垂体後葉から分泌されるホルモンの一つであり, 9個のアミノ酸か
らなるペプチドである。 いま, バソプレッシンの類似物質として合成されたペプチドVの
アミノ酸配列を以下の(1)~(5)の手順で決定した。 このペプチドVはパソプレッシンと同様
に9個のアミノ酸からなり,分子内にはジスルフィド結合により、6個のアミノ酸を含む環
状構造が1個形成されていることがわかっている。 以下では, ペプチドVのアミノ酸配列
を次のように表す (ジスルフィド結合は省略)。
phe 145 194
H₂N-0-2-3-6-8-8 10-8--COOH
Hel
アミノ末端
VI
カルボキシ末端
(1) ペプチドVに還元剤を加えて分子内のジスルフィド結合を切断した後, 6mol/Lの塩酸
とともに加熱して、 完全に加水分解したところ, 表1の8種類のアミノ酸だけが生成した。
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表 1
ペプチドVの構成アミノ酸
R-CH-COOH
NH2
アミノ酸
略号
R-
グリシン
Cly
H-
アスパラギン酸
Asp
HOOC-CH2-
グルタミン酸
Glu
HOOC – (CH2)-
システイン
Cys
HS-CH2-
シン
Lys
H2N- (CH2)4
フェニルアラニン
Phe
-CH2-
※プロリンの構造式
CH2
CH-COOH
チロシン
Tyr
HO
CH2-
H2C
NH
CH2
プロリン (注2)
Pro
※
(注2) プロリンの > NHと他のアミノ酸のCOOH からなる
G-N-もペプチド結合とよぶ。
0
酵素 E-1 は, 塩基性アミノ酸のカルボキシ基側のペプチド結合を特異的に加水分解する。
ペプチドVを酵素 E-1 によって加水分解したところ, ペプチド V-1 とグリシン Gly のみ
が1:1の物質量比で得られた。
リシン×1
-5-
酵素 E-2 は, ペプチドのカルボキシ末端側から順にペプチド結合を加水分解する。た
だし, カルボキシ末端のアミノ酸がプロリン Proの場合、 酵素 E-2は末端のペプチド結合
を加水分解できない。 (2)で得られたペプチド V-1 を酵素 E-2 によって加水分解したとこ
ろ, ペプチド V-2 とリシン Lys のみが物質量比1:1で得られた。
(4) 酵素 E-3 は, 芳香族アミノ酸のカルボキシ基側のペプチド結合を特異的に加水分解する。
(3)で得られたペプチド V-2に還元剤を加えて分子内のジスルフィド結合を切断した後,
酵素 E-3 によって加水分解したところ、 ペプチド V-3, ペプチド V-4,およびフェニルア
ラニン Phe が得られた。 V-3 と V-4 はいずれもシステイン Cys を含み、V-3はキサン
プロテイン反応に陽性であるがビット反応に陰であった。一方、V-4はビウレット
反応に陽性であった。
Cys/ The Cys / Phe
TYE
ペプチド V-4 を0.1mol/Lの希塩酸を用いておだやかに加水分解すると、アミノ酸と
ペプチドからなる混合物が得られた。 この混合物には2種類のトリペプチドが含まれて
いたので,これらを分離し, それぞれを6mol/Lの塩酸とともに加熱して、完全に加水分
解したところ,これら2種類のトリペプチドのアミノ酸組成は以下のようであった。
Asp. Glu, Cys), (Asp, Cys, Pro
問1
Glu
ASP C7
ksp cys Glu
表1に記したアミノ酸のうち、次のa,bに該当するアミノ酸をすべて選び、表中
この略号で記せ。
a. キサントプロテイン反応を示す。
b. pH6の条件で電気泳動を行うと, 陽極に移動する。
問2 下線部のジスルフィド結合の切断は, 2-メルカプトエタノールと反応させることに
よって行う。 ジスルフィド結合を含む化合物 RS-S-Rと2-メルカプトエタノー
ル HS-CH 2 CH 2 OH との反応を化学反応式で記せ。 ただし, 2-メルカプトエタノー
ルの還元剤としてのはたらきを示すイオン反応式は次式で示される。
2HS-CH2CH 2 OH→ HOCH2CH2 -S-S-CH2CH2OH+2H+ + 2e
問3 ペプチドVのアミノ酸配列を前のページの書き表し方に従って表すとき、手順(1)
~(3)の結果により, カルボキシ末端側の3つのアミノ酸⑦~⑨の配列が決まる。 該当
するアミノ酸を略号で記せ。
phe
7V HN-1-2-3-4-5-6-7-8-9-COOH
問4 ペプチドVのアミノ末端側のアミノ酸①~⑥に該当するアミノ酸を略号で記せ。
Cys - Tyr-phe-Glu Asp-Cys-pro-Lys
-6-