-
-
リード C
73. 遺伝子組換え 次の実験について, 以下の問いに答えよ。
実験 ヒトのDNA
に特定の塩基配列
を認識して切断する
酵素Aを作用させ物
て遺伝子Xを含む
DNA 断片を切り出し
た。また,同じ酵素
でブラスミドに切れ
目を入れた。両者を
寒天培地
amp
IPTG
X-Gal
観察された
白色
白色
コロニー
のみ
白色と
のみ
青色
表1 実験で用いた寒天培地と観察結果(+あり -なし)
生
公し切断点をつなぐ酵素Bをはたらかせた。この混合液を大腸菌に取りこませ
後その溶液を寒天培地(a), (b) ,(c))で培養すると,表1のようになった。
ここで使用したプラスミドはamp* と lacZ という遺図1
伝子をもつ(図 1)。 amp は抗生物質アンピシリン(amp)
を分解する酵素の遺伝子で,常に転写されており,こ
れがはたらくとアンピシリン耐性になる。lacZ は B
ガラクトシダーゼという酵素の遺伝子で,この酵素は
XGal という基質を分解し青色の色素を生成して大腸菌
コロニーを青くする。またこのプラスミドの lacZ の遺 0:オペレーター
ANO本
物
(イ)
lacZ
転写方向
0
| amp?
P
プラスミド
P:プロモーター
伝子発現は IPTG(イソプロピル-B-チオガラクトピラ
ノシド)という物質により誘導される(表1)。酵素Aにより切断されるプラスミドの位
置は図に示すようにlacZ内部にあるため,ここに DNA 断片が挿入されると lacZが分
断され,正常なβガラクトシダーゼを合成できなくなる。なお, 今回使用した大腸菌
は自身の lacZ 遺伝子はもたないものとする。
(1)下線部ア)のような酵素を一般的に何というか, その名称を答えよ。
(2) 下線部イ)のような酵素を一般的に何というか, その名称を答えよ。
(3) プラスミドのように外来性の遺伝子を運搬するはたらきをもち, 導入された細胞の
中で増殖することのできる DNAを一般に何というか。 その名称を答えよ。
表1で示す。 寒天培地(a)で見られる白いコロニーと寒天培地(c)で見られる白色と青
色のコロニーはそれぞれどのような大腸菌由来のコロニーであると考えられるか。
最も適切なものを(ア)~(オ)の中からそれぞれ1つ選び, 記号で答えよ。
(ア) プラスミドを受け取った大腸菌
(イ)プラスミドを受け取っていない大腸菌
(ウ)遺伝子Xのみを受け取った大腸菌
(エ)遺伝子Xが挿入されたプラスミドを受け取った大腸菌
(オ)何も挿入されていないプラスミドをもった大腸菌
『:酵素A切断部位
[13 長崎大改)