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小器官やそれ以外の成分を分離する方法である。 ある動物細胞から,
次のような細胞分画法(図1), 細胞小器官を分離した。
隠者 25 次の文章を読み,
論述
発展
細胞分画法は,細胞小器官の大きさや重さの違いを利用し,細胞
細胞破砕液
遠心分離
1000g
25
1)
上澄みa
遠心分離
20000g
上澄みb
遠心分離
150000g
2)
[沈殿B]
上澄み
まず, (ア) 4℃の環境のもと, 適切な濃度のスクロース溶液中で細
胞をすりつぶし、細胞破砕液をつくった。 次に,細胞破砕液を試験
管に入れて, 1000g (gは重力を基準とした遠心力の大きさを表す)
で 10 分間遠心分離し, 沈殿Aと上澄みa を得た。 これらを光学顕
微鏡で観察したところ, 沈殿Aには核と未破砕の細胞が含まれてい
たが,上澄み aには,これらは含まれていなかった。 上澄み a をす
べて新しい試験管に移し, 20000gで20分間遠心分離し, 沈殿Bと
上澄み b に分けた。 さらに, 上澄みb をすべて新しい試験管に移し,
150000g で180分間遠心分離し, 沈殿Cと上澄みcに分けた。 次に,
各沈殿と各上澄みについて, (1) 呼吸に関する細胞小器官に存在
する酵素Eの活性を測定し, 表1に示す結果を得た。 なお表中
のU (ユニット)は酵素Eの活性の単位であり, 表中の数値はこ
の酵素タンパク質の存在量に比例する。 また, 沈殿と上澄みは
すべて回収したものとする。
[沈殿A]
沈殿C
図1 細胞分画法
表1 各沈殿・上澄み中の酵素Eの活性(ひ)
沈殿 A
134 U
上澄み a
XU
沈殿 B
463 U
上澄み b
YU
沈殿 C
6 U
上澄み c
25 U
□ (1) 下線部(ア)について,この実験を4℃の環境のもとで行う理由を述べよ。
□ (2) サイトゾル (細胞質基質) に存在する酵素は, 沈殿 A, 沈殿 B, 沈殿 C, 上澄みcのうち、どの部分に最
多く含まれるか。
■ (3) 下線部(イ)について, 酵素Eが存在する細胞小器官は何か。
□ (4) 表1のXとYに入る数字をそれぞれ求めよ。
(5) 細胞をすりつぶした段階で, 未破砕のまま残った細胞の割合は何%か。 小数点以下を四捨五入して
よ。ただし,酵素Eが存在する細胞小器官は,細胞が破砕された場合, 1000g で10分間遠心分離して
沈殿しないものとする。
[20 埼玉大