4. 遺伝情報の発現 107
いにお
て転写
291. バイオデクノロジー■次の文章を読み, 下の各問いに答えよ。
PCR法では, DNA ポリメラーゼ, プライマーと呼ばれる短い1本鎖 DNA, 鋳型となる
2本鎖DNA, 4種類の塩基をもつヌクレオチドが必要である。 DNA ポリメラーゼは, プ
ライマーの3末端に鋳型 DNA の塩基配列と相補的な塩基をもつヌクレオチドを付加する。
思考判断 作図
ースをも
と、は
分解酵
して、
| 鋳型となる2本鎖 DNA を1本鎖にする変性反応が必要である。 サンガー法と
る DNA 断片の塩基配列決定法は DNA ポリメラーゼを用いる DNA 複製反応であ
ポ 通常の4種類のヌクレオチドに加えて, 新たに合成された DNAに取り込まれると
N隊のDNA合成を止める特殊なスクレオチドを加える必要がある。たとえば, アデニン
をもつ特殊なヌクレオチドを少量加えた反応液では, さまざまな箇所で特殊なヌクレオチ
ドが取り込まれて DNA 合成が停止する。同様に,他の3種の塩基についても特殊なヌク
レオチドを加えて別々に反応させる。 その後、
片の泳動パターンから鋳型 DNA の塩基配列を決定することができる。
開し PCR で好熱性細菌の DNAポリメラーゼが使用される理由を30字以内で記せ。
問2. PCR により, 次に示した DNAが増幅された。 PCR に使用した2種類のプライマー
の塩基配列を5側を左にして記せ。 ただし, プライマーは10塩基からなるものとする。
5-CATAAACCCCGATGCACCCCGATGCACCCCAGTCCAACGGACGATCTCGAGGACTTCA-3"
3-GTATTTGGGGCTACGTGGGGCTACGTGGGGTCAGGTTGCCTGCTAGAGCTCCTGAAGT-5"
問3. PCR で2本鎖 DNA を1本鎖にする理由を30字以内で記せ。
間4.下線部(a)について, 図1は, ある DNA断片
を増幅する際の反応温度の時間変化の一部を示し
たものである。変性反応に相当する部分を図中の
ア~ウから選べ。
問5.下線部b)について, 図2は, 4種類の反応液
を異なるレーンで電気泳動した結果である。この
DNA 断片の泳動パターンから, 泳動された DNA
の塩基配列を5側を左にして記せ。
問6.図2と同じ塩基配列決定実験
をくり返したが,ddC だけを加え
るべき反応液に, 誤って ddTも
加えて反応を行った。 この失敗に
気づかず,電気泳動した場合, 図
2にはない DNAのバンドが現れ
た。2回目の実験で新たに現れる
バンドを図2に描け。
ただし、
オペ。
できない
い。 した
ットース
RNAが
(b)4種類の反応液を電気泳動し, DNA 断
は酵素の
か。次
写を明
100
ア
80
くする
成を聞
60-
40
時間
図1
ラクト
つ模式
横報
レーン1(ddCを加えた反応液)
II
レーン2(ddGを加えた反応液)
レーン3(ddTを加えた反応液)
レーン4(ddAを加えた反応液)
電気泳動の向き
図2
(16. 筑波大改題)
diC が取り込まれると、そこで DNA の合成が止まるので, 付加された最後の
間5
ddA
第4章
遺伝情報の発現
トー
ウー
ウー
温度(C)